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服務與項目

酵母表達系統

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酵母表達系統兼有原核和高等真核系統的優點,具備培養條件普通、生長速度快、成本相對較低、能進行蛋白翻譯后加工、易獲得可溶性活性重組蛋白等特點,被廣泛用于重組蛋白尤其是真核蛋白的生產制備。其中巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)因其生長速度快、商業化表達載體豐富、可獲得高效的分泌表達等優點,使其成為酵母表達重組蛋白的優先選擇。

美迪西科研人員建立了成熟的酵母表達純化服務平臺,提供優質的重組蛋白在畢赤酵母和釀酒酵母中的表達與純化服務。

酵母表達系統服務項目:

  1. 重組酵母表達質粒構建;
  2. 重組質粒電轉化;
  3. 重組表達子篩選;
  4. 小規模蛋白表達和純化(2L培養基培養產物);
  5. 大規模蛋白表達和純化(10L以上)。 
步驟 實驗內容 實驗時間 備注
1 重組酵母表達質粒構建 2 周 可選擇不同載體;不同親和標簽;分泌或胞內表達
2 重組質粒電轉化 1周 不同表達菌株可選, PCR 鑒定5-10個克隆
3 重組表達子篩選 3-4周  5-10個克隆篩選, Zeocin抗生素濃度篩選重組子,結合Westernblot 方法鑒定重組蛋白表達
4 小規模蛋白表達和純化 2-4周 優化培養基,菌體密度,甲醇濃度,誘導時間等
5 大規模蛋白表達和純化 根據表達體積商定 可選擇搖瓶或者發酵罐培養

備注:

  1. 您可根據實驗需求選擇上述任一實驗內容,或相關實驗內容的組合
  2. 純化時選用親和純化、離子柱純化、疏水填料純化和分子篩純化; 蛋白本身特性,表達系統的選擇會影響最終蛋白的純度和活性。  

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